Sinh hoạt dân gian truyền thống là những sắc màu tạo nên bức tranh và sức hấp dẫn của một vùng đất, và đây cũng là đường nét chính tạo nên sự khác biệt của một cộng đồng cư dân. Hội An là nơi đô hội, nơi tập trung cư dân đến từ nhiều vùng miền khác nhau, họ tới đây mang theo những phong tục, tập quán, nét sinh hoạt của mình, để rồi cùng họ đồng tạo nên một bản sắc mới riêng có - bản sắc Hội An.
Nội dung của chủ đề này rất phong phú và rộng lớn, nhưng do diện tích trưng bày hạn chế nên bảo tàng chủ yếu phục dựng lại cách bài trí không gian trong một ngôi nhà cổ, bên cạnh đó trưng bày một số trang phục của người Hoa, người Việt ở Hội An, đồ dùng sinh hoạt,...Không gian trưng bày được bố trí tại gian sau ở tầng 2 của bảo tàng. - Trang phục truyền thống:Trang phục dân tộc là một trong những yếu tố thể hiện đậm nét nhất truyền thống văn hóa của một cộng đồng cư dân. Như chúng ta đều biết, Hội An đã sớm trở thành nơi tụ cư của nhiều nhóm người, trong đó đáng chú ý là cộng đồng người Hoa đến từ các tỉnh Quảng Đông, Phúc Kiến, Triều Châu,…Người Việt đến từ miền Bắc, vùng Thanh-Nghệ, vùng Thuận - Quảng. Những nhóm người này, kẻ trước người sau đến với Hội An, đem theo những thói quen sử dụng trang phục của mình đề dần hình thành nên những trang phục phù hợp với cảnh quan môi trường, xã hội ở vùng đất mới. Mặt khác, trong quá trình tồn tại và phát triển, những cộng đồng người này lại có giao lưu, ảnh hưởng qua lại lẫn nhau về văn hóa, hôn nhân…Phần trưng bày này giới thiệu những trang phục tiêu biểu của người Việt và người Hoa ở Hội An.
- Đồ dùng sinh hoạt: là những vật dụng hằng ngày gắn bó mật thiết với đời sống của cư dân phổ cổ Hội An. Đây chính là những hiện vật thể hiện rõ nét tính dân gian, đồng thời cũng chính là những hiện vật dễ bị ảnh hưởng, biến động nhất khi có những thay đổi trong đời sống xã hội của người dân. Ở nội dung này bảo tàng trưng bày các hiện vật rất phong phú như bàn, ghế, giường, tủ, đèn dầu, ấm, chén, mâm đồng, bàn ủi,... Đây là một sưu tập thể hiện sinh động cuộc sống thường nhật của người dân phố Hội. Những hiện vật này được trưng bày bố trí như không gian của một ngôi nhà cổ, tạo cảm giác gần gũi, người xem cảm nhận dường như chủ nhân của những hiện vật này vẫn sinh sống ở đây, vẫn sử dụng những đồ vật này.